PCR仪的性能指标中热盖温度值是什么？

发布时间2014-06-04        浏览次数：7781

摘要：PCR仪简单介绍试剂中不应该存在对PCR反应有影响的杂质，分析纯的就可以达到要求，下面细细分析。
、PCR仪相关知识：
先要知道什么是pcr试剂，PCR试剂简单的理解就是用于做PCR的试剂。实际做PCR的试剂很多，在这儿可以理解为达到PCR级别的试剂。试剂中不应该存在对PCR反应有影响的杂质。象核酸、核酸酶，盐离子尽可能的小，是超纯水。分析纯的就可以达到要求。
第二、在试剂的使用过程怎么分类选择：
1.提取试剂，包括了各种提取dna的常用试剂，和纯化dna所用的试剂。
2.pcr扩增试剂：主要是taq酶，四种碱基，缓冲试剂，引物。
3.产物检测试剂：琼脂糖，聚丙烯酰胺凝胶，aps，tmed，eb等等吧。

第三、pcr仪选择时要注意哪些事项？
1.空气加热，用空气做介质有优点，与反应体系无缝接触，但是空气的导热性差、比热小的弱点明显。因此空气加热的要利用离心来产生空气流动，增强导热性，同时使用毛细管，加大接触面积、试剂微量化来弥补。这样做了以后效果还是不错。但有的厂商把什么离心、毛细管的好处大讲特讲，对气加热的弱点闭口不谈，却是高明的市场手法。同时，使用离心，对标本量增大是有影响的并且标本量越大，空气比热小的弱点就越明显，所以空所加热的仪器标本量都比较小。
2.硅加热，这是使用普遍的一种，优点：易自动化、速度快、直接加热降温，效果当然好，但是成本较高，第二其使用的介质是金属，导热虽然好，但是与反应管，很难做到无缝接触，定性时代可以加油，但用荧光定，由于油有荧光信号不能用。所以在无缝接触上差一些。
3.PCR仪的性能指标中有一个是热盖温度，请问这个热盖温度值得是什么啊？
过去设好PCR反应后，必须向反应管中加入矿物油，以防止反应时液体蒸发，影响结果。但加入矿物油会给后续实验如电泳、柱纯化带来麻烦。而现在的PCR仪一般均配备热盖，热盖温度可设为105°C， 反应时热盖与样品管紧密接触， 使样品管顶部的温度也达到105°C 左右，反应液就不会产生蒸发，这样就无需再向反应管内加石蜡油。