非洲猪瘟检测荧光定量PCR仪采购要领
发布时间2019-04-18 浏览次数:1474
只有选择适合的仪器才能使其发挥应有的作用,因此在采购仪器之前一定要掌握相关的技巧。以下是非洲猪瘟检测荧光定量PCR仪采购要领,希望能够对大家有所帮助!
一、光源
光强比较:髙强度白光LED > 卤钨灯 >单色LED
白光LED的亮度约是卤钨灯的3倍左右,单色LED的10倍左右,能够捕捉到多的荧光信号,是专业光源领域的新技术代表,2011年开始普遍应用于专业仪器,无论光强、灵敏度与均一性可与上一代氙灯光源媲美,且寿命提升了10倍以上。
钨灯灯丝本身存在闪烁不稳定的问题,其激发能量远低于白光LED,事实上,无需高端品牌汽车的旗舰概念车,如丰田雷克萨斯,已经开始使用白光LED作为车头灯。
寿命比较:髙强度白光LED = 单色LED >卤钨灯
白光LED的寿命长达10000小时以上,一般可以使用5-10年左右,基本上超过了一般科研仪器的正常工作寿命,基本终身无需换光源,而卤钨灯光源基本每2年就要换一次,费时费力,南方是不足一年就要换一次
另:卤钨灯每次运行需要半小时预热,其中累计散发的热量对荧光具有明显的淬灭作用。
二、光路传导
光路的传导 光路设计应尽可能有效消除边缘效应,光路设计是否有效消除边缘效应,只有实验才能检验
检验方法:96/384孔板中及四角各布置标准品,看差异
其中
a、光源直接照射微孔板上:边缘效应明显
b、逐孔移动式采光:无边缘效应,但需时常校正
c、散射采光:边缘效应较明显,切换光源时需要光源组件移动
三、温控模块/Peltier
普通的Peltier加热方式具有明显边缘效应,均一性差,是上一代的模块PCR加热技术,正处于被淘汰的边缘。
目前好的温控模块:银,在金属中银的导热性能较高,升降温速度快,孔间温度均一性好,边缘效应相应减少
金属的热传导系数表:
银 429 >铜 401 > 金 317 >铝 237 >铁 80 >锡 67 > 铅 34.8
另:单一模块升降温速度高并不代表样本升降温速度也高,因此在温控模块升降温速度对比中,终是要看样本的升降温速度是否快
大升降温速度不等与平均升降温速度
四、检测器
荧光定量PCR灵敏度:冷CCD >CCD >光电倍增管 CPM >光电二管
CCD作为荧光信号的接受器,其质量直接决定了仪器的检测灵敏度和稳定性。
10℃的冷CCD,和常温CCD有着质的区别,在专业光学领域,冷CCD的造价成本至少要比常规CCD高出一倍以上。冷CCD在低的温度下进行光信号捕捉,能够提供高的光感灵敏度和低背景噪音。因此,有的非洲猪瘟检测荧光定量PCR仪能够稳定区分1000和2000拷贝的浓度差异,而有的只能做到区分5000和10000个拷贝数。